细胞污染小知识
Oxytech
细胞作为重要的实验模型广泛应用于各类生物实验, 几乎所有科研实验室中都需进行细胞培养。细胞培养过程中最大的威胁就是细胞污染, 凡是混入细胞培养环境中, 对细胞生存有害的成分和造成细胞不纯的异物都应视为污染。细胞一旦遭到污染,所有的实验结果都会变得毫无意义。因此, 及时检测并鉴定出所培养的细胞是否被污染至关重要。微生物污染是细胞培养中的一个主要问题，但是可以采用一系列程序来防止或消除污染。对实验室进行定期清洁、使用高效型消毒剂是避免细胞培养过程中由于实验室环境引起细胞污染的主要措施。
细胞培养主要常见污染
细胞培养污染主要分为两类，一是化学污染物，例如：培养基、血清和水中的杂质、内毒素、增塑剂和去污剂。
二是生物污染物，例如：细菌、霉菌、酵母、病毒、支原体、原虫以及其他细胞系的交叉污染。
那么究竟微生物造成细胞污染我们又该如何应对？
一、微生物污染分类
01
细菌污染
细菌污染是细胞培养中最常见的污染，其污染主要来源于实验室环境、实验人员（实验服）、实验用具等，甚至在细胞培养过程中添加抗菌素（一般为预防剂量），也可能因为操作不慎而引起污染。
种类：造成细菌感染最常见的有革兰氏阳性菌如枯草杆菌、葡萄球菌等；大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌也会造成细菌感染。
解决方法：
日常清洁时，在工作前和工作期间，对于细菌污染，特别是在发生任何泼溅后，应使用70%-75%的乙醇擦拭工作台面。
02
真菌污染
真菌污染是细胞培养过程中最常见的另一种污染，尤其在霉雨季节，霉菌污染尤为严重。另外由于真菌可以通过孢子繁殖，因此一旦污染很容易发生扩散。
种类：常见的真菌感染有烟曲霉菌、黑曲霉菌、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌污染等。
解决办法：
对于真菌污染，酒精对真菌的效力有限，可以使用奥克泰士即用型杀孢子剂来解决乙醇无法较好解决的酵母、霉菌、芽孢的污染问题。
03
支原体污染
支原体是一种大小介于细菌和病毒之间，并独立生活的原核微生物，广泛存在于人和动物体内。
种类：细胞培养中常见的支原体有口腔支原体、精氨酸支原体、莱氏无胆甾原体、猪鼻支原体、肺炎支原体和发酵支原体，其中前四者占据支原体污染的绝大比例。
支原体污染具有隐蔽性，他们可以与细胞长期共存，培养基一般不浑浊。大部分细胞被污染后似乎无明显变化，但其实支原体会抑制细胞生长，并且导致染色体畸变等，对细胞培养实验影响巨大。
解决方法：
可以使用过氧化氢银离子溶液，从源头遏制支原体污染，科学-精准消毒，生态无毒无残留同时呵护实验人员的职业健康，可以放心使用！
04
黑胶虫污染
黑胶虫是一种生物还是非生物，学术界至今还有争议。这里我们暂且将其认作是一种微生物。黑胶虫污染主要来源于血清。
特点：黑胶虫污染起初对细胞并无影响，当达到一定数量时则会影响细胞生长。受黑胶虫污染的细胞液通常清亮无变化，在高倍显微镜下可以观察到点状片状的游动小体，做布朗运动。
05
原虫污染
原虫：培养液可轻微浑浊，显微镜下那些细小的点状物数量非常多，轻微活动，细胞虽然可以生长但繁殖速度却明显减慢，而且细胞状态不好，边缘不清楚，细胞不透亮。他们与细胞可共生但会与细胞争夺营养。这种共生是非常普遍的，但他们的数量小，细胞站优势所以不会影响到细胞的正常生长，只有当他们到达一定的数量时就会影响到细胞的生长，最终形成恶性循环。
06
病毒污染
病毒作为一种比支原体更小的微生物，体型在nm级，很难用常规方法检测到。病毒污染分为外源性和内源性，污染主要来源为细胞系，常见于杂交瘤细胞。
特点：病毒污染的细胞液通常清亮无变化，大部分被污染的细胞也不会产生形态及病理现象，小部分病毒会造成细胞变圆、肿胀、脱落。
病毒污染可用血细胞吸附实验、免疫荧光抗体法以及电子显微镜法检测，但其清除是十分困难的，一旦不幸被污染，建议直接重新引入高质量细胞株。
总结：
Oxytech
第一步：使用前后，应对工作台面进行消毒，并定期清洁周围区域和设备。
第二步：日常清洁时，在工作前和工作期间，特别是在发生任何泼溅后，应使用70%乙醇擦拭工作台面。（70%-75%乙醇优势是对细菌具有较好的杀灭作用，但对真菌的效力有限，可以使用奥克泰士来解决乙醇无法较好解决的酵母、霉菌、芽孢的污染问题。）
第三步：细胞房环境要做全面的消杀，以及人员手部等防止二次污染！！
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