实验动物饮用水微生物污染的控制
实验动物作为实验模型为我们的临床前实验做出了很大的贡献。世界500强医药联合申明,他们医药产品的动物实验都将在AAALAC认证单位完成,他们的实验的开展都遵循AAALAC原则。动物房的动物饲养和动物实验设施要求都十分严格。对动物的饮食和饮用水也做出严格的要求,然而明明已经对饮用水消毒灭菌了,为什么检测饮用水时还会出现微生物污染的问题呢?
一、实验动物饮用水对的质量标准
实验动物饮用水的品质应符合其级别饮用水标准,水的pH、硬度、微生物状况及化学物质污染情况也要定期检测,保证水质的质量。在《实验动物—环境及设施国家标准》(GB14925-2001)中,关于实验动物饮水的要求表述为:普通实验室动物饮用水应符合《生活饮用水卫生标准》,屏障和隔离环境内饲养的实验动物饮用水须经灭菌处理。其中普通级实验动物饮用水的各项指标用符合GB5749的要求,详见表1。对于清洁级、SPF级、无菌级和悉生动物的饮用水指标的限制要求,详见表2
表1:GB 5749中的微生物指标
序号 | 微生物指标 | 限值 |
1 | 总大肠菌群/(MPN/100mL或CFU/100mL) | 不应检出 |
2 | 大肠埃希氏菌/(MPN/100mL或CFU/101mL) | 不应检出 |
3 | 菌落总数/(MPN/100mL或CFU/102mL) | 100 |
表2:实验动物饮用水卫生要求
指标 | 限值 |
菌落总数/(CFU/ mL) | 50(清洁级动物和无特定病原体级动物) |
0(无菌级动物和悉生动物) | |
铜绿假单胞菌/(CFU/ 250mL) | 0 |
二、实验动物饮用水的杀菌工艺
高压蒸汽灭菌是清洁级以上动物实验室水处理常用的方法。利用高温高压使微生物体内的蛋白质凝固死亡而达到灭菌的目的;膜过滤法也是一种深度处理水的新进手段,可以有效地除去水的臭味、色度、消毒副产物前体其他有机物和微生物。主要包括超滤膜过滤、反渗透膜过滤;还有就是在饮用水中加入抑菌剂、紫外线消毒和臭氧杀菌。
上述灭菌消毒方法都能起到很好的杀菌效果,但是动物饮用水单纯使用高压灭菌,操作复杂,劳动强度较大,灭菌时间长,且产量有限,灭菌成本较高。仅能杀灭水中的微生物,且长期消毒可使水瓶内形成水碱,水碱脱落会堵塞水嘴,影响动物饮水。膜过滤技术基建投资和运转费用高,特别是反渗透膜的价格较高,且膜有一定的使用期限,到期膜的通透性就会下降,必须定期更换过滤膜。
三、实验动物房/实验室饮用水微生物污染的原因?
上述的方法的实验动物饮用水的质量控制都十分可靠,但在现实中还是出现了微生物污染和超标情况,例如有一些水中的菌落总数超出限制、检出了霉菌等。刚制出的水是无菌的,但终端出水为什么还会染菌呢?
这多数是因为制水的罐体和分配管道等输水系统对饮用水造成的二次污染导致的,储罐和管道是微生物的控制盲区,因为在这里形成的微生物将不再有灭菌措施进行解决,当膜过滤系统中的膜超过使用期限后,膜的通透性下降,微生物就会趁机通过,在罐体和管道内壁或附着形成生物膜,进而大量繁殖,最终造成二次污染。
四、什么是生物膜呢?
当微生物会在膜周围、管道、罐体中繁殖、分化,并分化一些多糖基质,将菌体群落包裹其中而形成的微生物聚集体膜状物,由细菌、真菌原生动物和藻类的混合物组成,形成了生物膜。它大量繁殖,先形成单个,再聚集成多个,若是不加以治理,最后会覆盖整个涉水系统。
五、如何控制二次污染,解决生物膜问题呢?
奥克泰士是来德国进口的消毒液,安全高效杀菌。成分是过氧化氢银复合剂,与生物膜接触,使生物膜结构破碎与分离,清除管道内壁附着的生物膜与污物,适用于各类水系统相关的消毒,分解后生成水和氧气,不会有残留,无色无味无毒,且不会对实验动物产生不适。
使用奥克泰士对实验动物的饮水管道和罐体定期消毒,可以清除其中的生物膜,防止生物膜的生成,能够弥补传统灭菌消毒的盲区,且能够有效控制铜绿假单胞菌、绿脓杆菌与金黄色葡萄球菌,防止饮用水在动物的二次污染。
总的来说,奥克泰士能够补充传统消毒方式上的盲区,解决实验动物饮用水微生物污染问题,保证实验动物饮用水安全,遵循AAALAC原则,保障实验动物权利。
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